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細(xì)胞株組織修復(fù)

細(xì)胞株在一項(xiàng)有望讓這種干細(xì)胞療法開(kāi)發(fā)更加容易的研究中，來(lái)自麻省理工學(xué)院（MIT）和新加坡-麻省理工學(xué)院學(xué)術(shù)聯(lián)盟（SMART）的一個(gè)研究小組，已經(jīng)確定了MSCs的三個(gè)物理特性，利用這些特性，可以將其與骨髓中存在的其他免疫細(xì)胞區(qū)分開(kāi)來(lái)。基于這些信息，他們計(jì)劃一種能夠快速分離MSCs的設(shè)備，使我們更容易地產(chǎn)生足夠干細(xì)胞用于患者治療。直到現(xiàn)在，仍然還沒(méi)有很好的方法，能夠從已經(jīng)開(kāi)始分化成其他細(xì)胞類型、但是細(xì)胞表面共有相同分子的骨髓細(xì)胞中分離MSCs。本文資深作者、MIT材料科學(xué)與工程、...

培養(yǎng)原代細(xì)胞的凍存步驟

原代細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。1．凍存細(xì)胞（1）選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前1d換液。（2）按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)5×107／ml左右密度，離心，去上清。（3）加入配制好的凍存液（培養(yǎng)液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO1ml，5.6%NaHCO30.1ml），按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存...

原代細(xì)胞間的甲基化變異如何解析？

原代細(xì)胞具有非常高的異質(zhì)性，在胚胎干細(xì)胞群體中不同的子群具有不同的細(xì)胞狀態(tài)，并在基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控及表觀遺傳修飾方面均表現(xiàn)出廣泛的差異。異質(zhì)的DNA甲基化在平衡ESCs自我更新和多分化潛能之間具有重要作用，因此細(xì)胞間DNA甲基化異質(zhì)性的研究對(duì)于理解胚胎干細(xì)胞生物學(xué)問(wèn)題十分重要。近年來(lái)，單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)已經(jīng)成為研究復(fù)雜組織中細(xì)胞間甲基化異質(zhì)性的有力工具，但怎樣分析并解釋單細(xì)胞間的甲基化變異仍具有很大挑戰(zhàn)。中國(guó)科學(xué)院北京基因組所呂雪梅研究組與美國(guó)弗吉尼亞理工大學(xué)謝荷煌研究團(tuán)隊(duì)合...

分享細(xì)胞系的生命周期

細(xì)胞系原代培養(yǎng)是從體內(nèi)取出組織細(xì)胞開(kāi)始培養(yǎng)到*次進(jìn)行傳代之前的時(shí)期，是一個(gè)特征性的必然的生長(zhǎng)階段，完成了從體內(nèi)到體外環(huán)境的過(guò)度和適應(yīng)過(guò)程，恢復(fù)了分裂增殖與生長(zhǎng)發(fā)育的能力。其性狀似體內(nèi)，可表達(dá)某些形態(tài)、結(jié)構(gòu)、更能，更能代表活體細(xì)胞zui接近在體使的情況傳代期--細(xì)胞系：將原代培養(yǎng)物經(jīng)過(guò)分割，重新接種到兩個(gè)或兩個(gè)以上的器皿內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，進(jìn)入傳代培養(yǎng)期，是整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程的主要時(shí)期。原代培養(yǎng)物要經(jīng)過(guò)反復(fù)傳代，傳代培養(yǎng)期要經(jīng)過(guò)反復(fù)傳代。傳代培養(yǎng)期并不單指培養(yǎng)物經(jīng)傳代后的*代培養(yǎng)過(guò)程，而是指...

原代細(xì)胞擴(kuò)展應(yīng)用

這種新的原代細(xì)胞提取方法是基于ETH過(guò)去幾年開(kāi)發(fā)出的一種微注射系統(tǒng)，即FluidFM，它是“世界上zui小的自動(dòng)注射器”。這已經(jīng)給生物學(xué)家提供一種將物質(zhì)注射到單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的方法。FluidFM和它的納米注射器也適合通過(guò)負(fù)壓輕輕地吸附細(xì)胞，然后將它們重新安置在其他的地方。Vorholt教授和他的研究團(tuán)隊(duì)對(duì)這種微注射系統(tǒng)進(jìn)行進(jìn)一步改進(jìn)，從而也允許從細(xì)胞區(qū)室中提取出物質(zhì)。Guillaume-Gentil評(píng)論道，“一個(gè)特別重要的方面是為這種微針找到合適的涂層以便防止被細(xì)胞物質(zhì)污染。”另...

原代細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)方法原理原代細(xì)胞融合的誘導(dǎo)物種類很多．常用的主要有滅活的仙臺(tái)病毒(Sendaivirus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和電脈沖。目前應(yīng)用zui廣泛的是聚乙二醇，因?yàn)樗椎谩⒑?jiǎn)便，且融合效果穩(wěn)定。PEG的促融機(jī)制尚不*清楚，它可能引起細(xì)胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團(tuán)發(fā)生結(jié)構(gòu)重排。實(shí)驗(yàn)材料雞紅細(xì)胞試劑、試劑盒PEGHanks液儀器、耗材顯微鏡離心機(jī)水浴箱離心管試管載玻璃片蓋玻片實(shí)驗(yàn)步驟1.取新鮮雞血以0.85%生理鹽水制成10%的懸液。2.稱取0.5...

原代細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途

1、原代細(xì)胞科學(xué)研究：藥物研究開(kāi)發(fā)與基礎(chǔ)研究藥物研究與開(kāi)發(fā)(1)新藥篩選：如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開(kāi)發(fā)：如病毒性疫苗的研究與開(kāi)發(fā)（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3)基因工程藥物研究與開(kāi)發(fā)：如干擾素研究與開(kāi)發(fā)，細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究與開(kāi)發(fā)等。(4)細(xì)胞工程藥物研究與開(kāi)發(fā)：生物活性多肽研究與開(kāi)發(fā)，人參皂甙、紫杉醇等生物活性成分研究與開(kāi)發(fā)。(5)單克隆抗體制備：包括診斷用單克隆抗體，治療用單克隆抗體。基礎(chǔ)研究(1)藥物作...

腫瘤細(xì)胞染色體數(shù)目異常的原因

腫瘤細(xì)胞分裂是指細(xì)胞分裂為兩個(gè)相同副本的過(guò)程。普通人的一生中要經(jīng)歷無(wú)數(shù)次的這一過(guò)程。為了生成兩個(gè)*相同的副本，細(xì)胞必須地分離它們的染色體，這一事件依賴于稱之為動(dòng)粒（kinetochore）的專門結(jié)構(gòu)將染色體雙向附著到紡錘體微管上。在細(xì)胞分裂的早期階段，動(dòng)粒結(jié)合紡錘體微管會(huì)發(fā)生許多的錯(cuò)誤。正常的細(xì)胞能夠有效地糾正這些錯(cuò)誤，確保染色體正確分離。而癌細(xì)胞通常不會(huì)糾正這些錯(cuò)誤，使得子細(xì)胞染色體數(shù)目異常，從而幫助這些癌細(xì)胞抵抗化療。在這項(xiàng)新研究中LilianKabeche博士和Duan...