商品屬性：

產品信息：

產品名稱 小鼠卵泡膜細胞

組織來源 卵巢組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠卵泡膜細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產生卵以及類固醇。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的對卵圓形的生殖器官，它的外表有層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質位于，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和神經。哺乳動物的卵巢內卵泡的發育需要相關的調節才能完成，垂體（卵泡刺和黃體生成素）使原始卵泡開始發育，其過程中還產生大量的雌。雌是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體的作用下協同合成的，卵泡膜細胞合成的雄透過基膜進入顆粒細胞，并轉變為雌。因此，卵泡膜細胞在生殖內分泌調節中占有關鍵的位置，了解其在病理及生理中的作用，對于與性有關的婦產科疾病（如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等）的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發育的過程中，卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以持卵泡結構的完整性，參與構成卵母細胞和顆粒細胞發育的微環境且為類固醇的生成提供底物。在哺乳動物中調節膜細胞類固醇生成的機制已見相關報道，但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

方法簡介 實驗室分離的小鼠卵泡膜細胞采用先機械分離后膠原酶消化結合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠卵泡膜細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養基

培養基： 小鼠卵泡膜細胞 專用培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液： 0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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