商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 兔下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞

組織來(lái)源 腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡(jiǎn)介 兔下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動(dòng)和內(nèi)分泌活動(dòng)的較高級(jí)神經(jīng)中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區(qū)和視上區(qū)）﹑中部（結(jié)節(jié)區(qū)）和后部（乳頭體區(qū)）。下丘腦具有許多細(xì)胞核團(tuán)和纖束﹐與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動(dòng)以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來(lái)自其他部位的神經(jīng)纖有廣泛的突觸聯(lián)系，可以接受很多神經(jīng)沖動(dòng)，為內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能，合成神經(jīng)垂體及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進(jìn)行體外培養(yǎng)，建立下丘腦神經(jīng)元體外實(shí)驗(yàn)平臺(tái)具有重要意義。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的兔下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的兔下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin-Ⅲ免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×） 、PBS 、培養(yǎng)基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養(yǎng)基： 兔下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長(zhǎng)特性： 貼壁

細(xì)胞形態(tài)： 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液： 0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無(wú)菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液。

?注意事項(xiàng)?：消化時(shí)間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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