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更新時間:2026-01-14
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免疫組化對照的選擇其實是個技術直接看關鍵點:
一、對照類型怎么選
?陽性對照?
?選材?:用已知表達目標抗原的組織(如HER2檢測用乳腺癌組織)
?關鍵?:與實驗組同步處理,避免固定時間差異
?陰性對照?
?兩種方案?:
省略一抗,僅用二抗+顯色劑
用同種屬無關抗體替代一抗
?注意?:若顯色,需排查抗體交叉反應
?空白對照?
?操作?:僅用二抗+顯色劑
?意義?:排除二抗非特異性結合
?替代對照?
?操作?:用同種屬無關抗體替代一抗
?示例?:一抗為mouse anti rat CD11b,同型對照為mouse IgG2a
二、操作要點
?陽性對照?:需用獨立已知陽性樣本驗證體系有效性
?陰性對照?:需用不表達目標抗原的樣本
?空白對照?:需省略一抗,僅用二抗和顯色劑
?同型對照?:需嚴格匹配一抗的種屬、Ig亞型、標記物及濃度等參數
三、結果判讀
?陽性對照?:若未顯色,需排查抗體失效或操作失誤
?陰性對照?:若顯色,需排查抗體交叉反應或封閉不充分
?空白對照?:若顯色,需排查二抗非特異性結合
?總結?:對照設置需嚴格匹配抗體特性、染色系統及背景干擾,通過多維度對照確保結果真實性。
上一個:沒有了
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