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人類體細胞染色體標本制備實驗原理和操作步驟

人類體細胞染色體標本制備實驗原理和操作步驟實驗原理染色體是在顯微鏡下可見原代細胞有絲分裂過程中出現的結構。因此，必須獲得染色體標本才能進行檢查分析，通常情況下，都是利用外周血淋巴細胞進行核型分析。正常情況下，人體外周血淋巴細胞不再分裂，但植物血凝素（PHA）可刺激血中的淋巴細胞轉化成淋巴母細胞，使其恢復增殖能力。因此，可采取少量外周靜脈血，做短期培養，培養至72小時細胞進入增殖旺盛期，此時加入秋水仙素抑制細胞分裂，使細胞分裂停止在中期以獲得足夠量的分裂期細胞，經低滲、固定、制...

培養原代細胞時哪些問題需要注意

培養原代細胞時哪些問題需要注意1.原代細胞用1640加10%胎牛血清，有的種系用DMEM.血清要求質量較高，在普通血清中細胞生長不太好。1640用雙蒸水溶解，按說明加入碳酸氫鈉。2.培養液中應加入HEPES，起緩沖pH值的作用，否則會影響細胞狀態。如果用20%的HEPES，每次配培養液時每200ml培養液可加入5ml.加入HEPES后1640培養液顏色略呈橘黃色而非暗紅色。3.消化所用胰酶可選擇0.125%濃度，且不要消化時間太長。也有研究者認為不用胰酶，直接吹打使細胞脫壁，...

造血干細胞的基本特性

造血干細胞的基本特性造血干細胞的多向分化潛能使造血干細胞分化為各類祖細胞系,祖細胞又可以分化為各種類型的血細胞。在造血干細胞發育、成熟的過程中,除了分化為成熟的細胞,部分細胞會衰老、死亡。為了維持終生造血,造血干細胞會不斷地進行自我更新。但是在一次次的DNA復制和細胞分裂中又增加了突變的可能。在成體中,70%的HSC處于靜息狀態,這種狀態可使終生存在的造血干細胞可以盡可能減少由于增殖帶來的基因組不穩定性,降低細胞應激帶來的傷害。當造血干細胞受到信號刺激時,靜息的造血干細胞就會...

雜交瘤細胞技術分析

雜交瘤細胞技術分析克隆化的細胞可以在體外進行大量培養，收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養法得到的單克隆抗體有限，其不能超過特定的細胞濃度，且每天要換培養液。而體內雜交瘤細胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細胞具有從親代淋巴細胞得來的腫瘤細胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小鼠（無胸腺的裸鼠），雜交瘤細胞就開始無限地繁殖，直至宿主死亡。產生腫瘤細胞的小鼠腹水和血清中含有大量的雜交瘤細胞分泌的單克隆抗體，這種抗體的效價往往高于培養細胞上清液...

體外培養的細胞系差異和分化

體外培養的細胞系差異和分化1、差異：細胞系離體后，失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響，生活在缺乏動態平衡的相對穩定環境中，日久天長，易發生如下變化：分化現象減弱；形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發生轉化獲得不死性，變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此，培養中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體，它們既保持著與體內細胞相同的基本結構和功能，也有一些不同于體內細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養后，這種差異就開始發生了。雖然體外細胞與機體細胞存...

選購細胞株需要考慮哪幾個因素

選購細胞株需要考慮哪幾個因素1、細胞株的生物等級，由于有些細胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。2、報關時盡量提供比較充足的證明材料，以免擔擱時間而導致干冰揮發完細胞株死亡，甚至于被退回給發貨人。選購細胞株注意事項3、在購買國外細胞株時，需交待國外加比較多的干冰一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。4、如果通過國外細胞株在國內的代理商購買的話，合同中需注明以下一些內容：1）.明確的到貨時間，這個時間需注明的是工作日，還是普通日。2）.在接到細胞株后，要求...

原代細胞生物學從哪幾個方面學習

原代細胞生物學從哪幾個方面學習*、認識原代細胞生物學課程的重要性，正如原子是物理性質的zui小單位，分子是化學性質的zui小單位，細胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫學獎大都授予了從事細胞生物學研究的科學家，可見細胞生物學的重要性。如果你將來打算從事生物學相關的工作，學好細胞生物學能加深你對生命的理解。第二、明確細胞生物學的研究內容，即：結構、功能、生活史。生物的結構與功能是相適應的，每一種結構都有特定的功能，每一種功能的實現都需要特定的物質基礎。如肌肉可以收縮、...

原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制

原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養液中，再過濾除菌。每1000ml培養液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調pH至7.2，濾過除菌后使用。原代細胞此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養液加入lml貯存液，zui終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用...