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細胞株凍存技術

細胞株實驗室低溫保存設備包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。檢驗冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常規冰箱放置溫度計；2、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復開門很多化合物都可以作為凍存保護劑，它們既可以單獨使用也可以聯合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有準則，但是大家普遍認為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保...

細胞株究竟如何通過“握手”區分敵我

細胞株是免疫系統中的重要安全守衛，zui近一項研究發現它們能夠使用一種類似"握手"的方式區分它們遇到的細胞究竟是朋友還是敵人。這項發表在學術期刊PNAS上的研究由埃默里大學的物理生化學家KhalidSalaita領導，他主要從事細胞活動中的機械力研究。一直以來人們已經熟知了T細胞對抗原遞呈細胞遞呈的抗原肽的識別過程，但是T細胞究竟如何區分抗原配體上的微小修飾以及T細胞如何決定是否做出應答一直沒有得到*了解。由于T細胞具有很高的機動性，并且抗原識別過程發生在T細胞與抗原遞呈細胞...

原代細胞培養中不要使用抗生素的原因

原代細胞由于過濾技術的提高和超凈臺質量的改進，在規范的細胞培養操作過程中引進污染的機會已經被大大降低了。所以比較合理的建議是，在常規的細胞培養中不要使用抗生素。只有在培養污染源很多（比如組織培養），或者培養非常珍貴的細胞株時才使用抗生素。抗生素雖然減少了可以觀察到的細菌、酵母等微生物的污染機會，卻會增加支原體、病毒等隱性污染的機會。因為細胞培養中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧，而這些微粒和汽霧可以同時攜帶支原體、病毒和其他微生物。當抗生素使用時，可見污染被抑制而隱性污染又沒...

原代細胞培養的起源

原代細胞是在標準條件下用有限或連續細胞系開展工作的.所以,考慮培養物中的細胞成分非常重要.如細胞在誘導條件下表現分化特征,要么意味著培養的細胞是成熟的,保持其持續合成特殊蛋白質的能力就夠了;要么意味著培養細胞由前體細胞或干細胞組成,這些細胞有增殖能力,美工維持未分化狀態,當有了合適的誘導條件,其中的一些或全部細胞會成熟并分化.有指導意義的考慮是,把培養物看成是由多能干細胞,未分化的定向前體細胞和成熟細胞組成的平衡狀態,并且,這種平衡可隨環境條件變化而改變.在細胞密度較低的情況...

原代細胞新打印技術存活率高

研究人員開發出一種可將原代細胞打印到任何表面和幾乎任何形狀上的技術，且整個過程中幾乎所有的細胞仍能存活。新技術猶如中國古代木刻版印刷術和現在兒童橡皮印章玩具，與噴墨打印方法有所不同。這種方法在短短半個小時內可產生2D細胞陣列，打印出的細胞緊密到接近5微米（大多數動物細胞在10到30微米寬），并允許使用許多不同類型的細胞。研究人員將這種技術命名為批量細胞打印（BloC打印）。噴墨打印方法打印二維和三維細胞已基本成功，但有時只有一半細胞在打印過程中存活。秦立冬說：“基于噴墨的細胞...

原代細胞分析之全攻略

原代細胞轉錄組學和蛋白質組學NanoStringTechnologies的科學家發現，細胞群體的RNA平均表達水平不一定與群體中單個細胞的RNA表達相同。例如，有些基因持續在低水平表達，而另一些則在短時間內大量表達。對宏觀測定而言，這樣的表達模式被平均化。該公司*的數字表達譜分析系統能直接對單個RNA分析進行計數，zui多可分析單細胞中的800個不同分子。這是利用nCounterSingleCellGeneExpressionAssay中的分子條形碼來實現的，它識別特定的RN...

避免污染的原代細胞培養方法

培養原代細胞常規方法需用二氧化碳溫箱，且為保持箱內二氧化碳氣5%～10%的濃度，需持續輸入二氧化碳氣體。為此，箱內的培養瓶蓋不能擰緊以便二氧化碳氣體自由進出。*步，配制1L培養液。培養基中含有酚紅指示劑，偏堿時液體為深紅或紫色，偏酸時則呈黃色。取配1L培養液的粉劑培養基，加入750ml三蒸水或去離子水，搖勻(一般培養液呈橘紅色)；再加入碳酸氫鈉1～1．1g，至*溶解(呈深紅色)；zui后再加三蒸水或去離子水至1L止。第二步，插吸管于配好的培養液內，通入二氧化碳氣體。隨著二氧化...

原代細胞被支原體污染的危害

為什么有些原代細胞實驗無法重復？為什么有的細胞在相當長的時間里，都養不到好的狀態？為什么實驗室中，超過一株以上的細胞都時好時壞？細胞生長緩慢、細胞變形、碎片增加、懸浮細胞容易成團、培養基提前變色、鏡下發現有小黑點……如果排除了其他試劑選擇不當、細胞株老化、細菌污染等原因，而仍有上述一種或幾種情況，則高度提示——你的細胞可能被支原體污染了！支原體污染普遍存在據美國數據統計，細胞發生支原體污染的幾率在70%以上。同時，由于支原體直徑很小，僅在180nm~350nm之間，只有通過電...