細胞簡介：

產品名稱 小鼠陰道上皮細胞

組織來源 陰道組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠陰道上皮細胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路，也是個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層，即黏膜層、肌層和外膜，陰道黏膜是外層，也就是淺表的那層，相當于皮膚的外面層樣。陰道上皮呈粉紅色，表面為復層鱗狀上皮，但無角化層。在正常的月經周期中，陰道上皮脫落的上皮細胞的形態隨著卵巢內分泌的變化而改變，因此通過陰道脫落上皮的病理檢查便可以初步判斷卵巢的內分泌功能狀況。陰道粘膜是指陰道內壁分泌的保持陰道內壁表面濕潤，保持表面活力的粘液膜層，因為其表面多粘稠，故為粘膜。在卵泡期，陰道粘膜受雌作用，上皮增厚，表皮細胞角化；陰道上皮細胞內糖原豐富（注：陰道粘膜上皮是復層扁平上皮又名“復層鱗狀上皮"），在陰道桿菌作用下分解為乳酸，保持陰道的酸性環境；排卵后，受孕作用，陰道粘膜上皮大量脫落，角化現象消失。

方法簡介 實驗室分離的小鼠陰道上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠陰道上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1×）或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型（1 mg/mL） 、PBS 、培養基

包被條件： 鼠尾膠原Ⅰ（2-5 μg/cm2）

培養基： 小鼠陰道上皮細胞培養基(基礎培養基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 上皮細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。