商品屬性：

產品信息：

產品名稱 小鼠心肌細胞

組織來源 心臟組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠心肌細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規則形狀；細胞培養2 h后開始貼壁，呈梭形；到12 h左右，細胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細胞分離培養48 h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細胞會出現搏動；心肌細胞為終末分化細胞，在體外不增殖。體外培養的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點，并具有自發性節律搏動，且心肌細胞的培養具有簡便、定量、重復性好以及不受神經體液因素的影響等特點。利用培養的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節，研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景，對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介 實驗室分離的小鼠心肌細胞采用膠原酶-聯合消化法結合差速貼壁法，并用化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠心肌細胞經α-Sarcomeric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×） 、PBS 、培養基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養基： 小鼠心肌細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 梭形、多角形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液： 0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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