商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 小鼠下頜骨成纖細胞

組織來源 下頜骨組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠下頜骨成纖細胞分離自下頜骨組織；下頜骨位于面下部，呈弓形，圍成口腔的前壁和側(cè)壁，是面部能活動的骨骼；其水平部分為下頜體，其垂直部分為下頜支，表層為骨密質(zhì)，內(nèi)部為骨松質(zhì)，與顳骨關節(jié)凹組成顳下頜關節(jié)。下頜體分內(nèi)、外兩面及上、下兩緣。下頜支分兩面、四緣及兩突。下頜支與顳骨形成關節(jié)。該關節(jié)非常靈活，可做出包括咀嚼動作在內(nèi)的多種動作下頜骨的骨小梁也順應咀嚼肌的拉力和力傳送的方向而排列，斜向上后排列成線形；下頜骨的骨質(zhì)較致密，血供較差，除主要接受下齒槽動脈血供外，又接受來自骨表面黏骨膜動脈分支的血液。成纖細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30 min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6 h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介 實驗室分離的小鼠下頜骨成纖細胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠下頜骨成纖細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 小鼠下頜骨成纖細胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-3代左右

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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