商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 小鼠外周血淋巴細(xì)胞

簡(jiǎn)稱 PBL;PPL

組織來源 外周血

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細(xì)胞簡(jiǎn)介 小鼠外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血；所謂的外周血，即除骨髓之外的血液，就是已經(jīng)被造血器官釋放入循環(huán)系統(tǒng)參與循環(huán)的血，它區(qū)別于造血器官內(nèi)的未成熟的血細(xì)胞或未被釋放入循環(huán)的血細(xì)胞。外周血淋巴細(xì)胞（Peripheral Blood Lymphocyte）簡(jiǎn)稱PBL，主要是血液循環(huán)中的淋巴細(xì)胞，由T細(xì)胞和B細(xì)胞組成，其中T細(xì)胞（占70%-80%）和B細(xì)胞（占20%-30%）。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為1×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血淋巴細(xì)胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 小鼠外周血淋巴細(xì)胞 培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長(zhǎng)特性： 懸浮

細(xì)胞形態(tài)： 圓形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 不增殖；不傳代

消化液： 0.25%

原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

取材與預(yù)處理?：取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細(xì)胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時(shí)后換液。

?注意事項(xiàng)?：消化時(shí)間需嚴(yán)格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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