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產品名稱 | 小鼠外周血淋巴細胞培養 | 英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Lymphocytes |
產品規格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7625 |
產品信息:

產品名稱 小鼠外周血淋巴細胞
簡稱 PBL;PPL
組織來源 外周血
產品規格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 小鼠外周血淋巴細胞分離自外周血;所謂的外周血,即除骨髓之外的血液,就是已經被造血器官釋放入循環系統參與循環的血,它區別于造血器官內的未成熟的血細胞或未被釋放入循環的血細胞。外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte)簡稱PBL,主要是血液循環中的淋巴細胞,由T細胞和B細胞組成,其中T細胞(占70%-80%)和B細胞(占20%-30%)。
方法簡介 實驗室分離的小鼠外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×10? cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的小鼠外周血淋巴細胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養基
培養基: 小鼠外周血淋巴細胞 培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 懸浮
細胞形態: 圓形
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 不增殖;不傳代
消化液: 0.25%
原代細胞培養步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,37℃、5% CO?培養,24小時后換液?。
培養方法?:

原代細胞培養?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養皿。
37℃、5% CO?培養,24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養。
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