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原代細(xì)胞
小鼠原代細(xì)胞
YS-01X7247小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞規(guī)格





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞規(guī)格 | 英文名稱 | Mouse Renal Cortical Epithelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X7247 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞
組織來源 腎組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌的降解場(chǎng)所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。
方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1×)或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1 mg/mL) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: 鼠尾膠原Ⅰ(2-5 μg/cm2)
培養(yǎng)基: 小鼠腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳1-2代
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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