商品屬性：

產品信息：

產品名稱 小鼠腦膜成纖細胞

組織來源 腦膜組織

產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠腦膜細胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，共有三層，由外向內為硬腦膜、蛛網膜和軟腦膜。腦膜細胞圍繞著大腦，參與中樞神經系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。

方法簡介 實驗室分離的小鼠腦膜成纖細胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的小鼠腦膜成纖細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 小鼠腦膜成纖細胞 培養(yǎng)基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-2代

消化液： 0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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