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原代細(xì)胞
小鼠原代細(xì)胞
YS-01X7538小鼠肌源性干細(xì)胞價(jià)格





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PRODUCT CATEGORY相關(guān)文章
ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 小鼠肌源性干細(xì)胞價(jià)格 | 英文名稱 | Mouse Myogenic Stem Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X7538 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠肌源性干細(xì)胞
簡(jiǎn)稱 MSC
組織來源 骨骼肌組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡(jiǎn)介 小鼠肌源性干細(xì)胞分離自肌肉組織;肌源性干細(xì)胞(MDSCs)屬于成體多能干細(xì)胞,具有多細(xì)胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞和組織類型;作為基因治療和組織工程的供體細(xì)胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營(yíng)養(yǎng)不良等疾病的研究熱點(diǎn);近年來,肌源性干細(xì)胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細(xì)胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細(xì)胞;平時(shí)處于靜止?fàn)顟B(tài),在細(xì)胞應(yīng)激和組織缺失時(shí)才會(huì)激活;并且隨著年齡的增加,所含細(xì)胞數(shù)量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對(duì)成體進(jìn)行。肌源性干細(xì)胞的體外擴(kuò)增對(duì)細(xì)胞移植和干細(xì)胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對(duì)肌源性干細(xì)胞的擴(kuò)增研究發(fā)現(xiàn),EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細(xì)胞增生。更重要的是,細(xì)胞因子誘導(dǎo)的體外擴(kuò)增可以通過自我更新不刺激細(xì)胞分化,從而保持干細(xì)胞表型。
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肌源性干細(xì)胞采用膠原酶--聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法,后通過肌源性干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肌源性干細(xì)胞經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、 多聚-L-賴溶液(1×)或多聚-L-賴溶液(10×) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: PLL(0.1 mg/mL)
培養(yǎng)基: 小鼠肌源性干細(xì)胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長(zhǎng)特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 成纖細(xì)胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳2-3代
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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