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原代細(xì)胞
小鼠原代細(xì)胞
YS-01X8499小鼠骨外膜細(xì)胞價格





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨外膜細(xì)胞價格 | 英文名稱 | Mouse Periosteal Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8499 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠骨外膜細(xì)胞
組織來源 骨組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 小鼠骨外膜細(xì)胞分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有種能夠生成骨的細(xì)胞,稱為成骨細(xì)胞,這種細(xì)胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外種專門破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞,稱為破骨細(xì)胞。這兩種細(xì)胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細(xì)胞像建筑工人,不停地生成新的骨組織,破骨細(xì)胞則像修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu),并且還負(fù)責(zé)拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學(xué)的需要。正常情況下,兩種細(xì)胞之間處于動態(tài)的平衡之中,完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝。骨折之后,成骨細(xì)胞首先啟動,從而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢復(fù)了骨的連續(xù)性,往往不符合生物力學(xué)的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細(xì)胞的參與才能完成。
方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨外膜細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨外膜細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 小鼠骨外膜細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 成纖細(xì)胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳2-3代左右
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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