商品屬性：

產品信息：

產品名稱 人皮膚肥大細胞

組織來源 皮膚組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人皮膚肥大細胞分離自皮膚組織；皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細胞因子，參與免疫調節（T細胞、B細胞、APC細胞活化）。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達大量的IgE-Fc受體，釋放過敏介質。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細胞同樣，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質，可在組織內引起速發型過敏反應（炎癥）。由于在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸，使細胞多陷于崩壞。肥大細胞呈圓形或卵圓形，細胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細胞。細胞常成堆或單個分布于血管附近。細胞呈圓形或卵圓形，細胞質中充滿大小一致、染成藍紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。

方法簡介 實驗室分離的人皮膚肥大細胞采用膠原酶-混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人皮膚肥大細胞經CD117免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 人皮膚肥大細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 圓形、梭形、多角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳1-2代

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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