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產品名稱 | 人肺大靜脈平滑肌細胞品牌 | 英文名稱 | Human Pulmonary Great Vein Smooth Muscle Cells |
產品規格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7017 |
產品信息:

產品名稱 人肺大靜脈平滑肌細胞
組織來源 肺靜脈組織
產品規格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 人肺大靜脈平滑肌細胞分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環的低壓、低阻的狀態,必須保證整個肺循環系統的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈,再入左心室,經過左心室收縮進入體循環,才能避免肺動脈內壓力升高。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。該細胞參與血管壁炎癥反應,保持靜脈管腔的通暢,還是多數動脈疾病的靶細胞。
方法簡介 實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的人肺大靜脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養基
培養基: 人肺大靜脈平滑肌細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細胞形態: 成纖維細胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液:0.25%
原代細胞培養步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,37℃、5% CO?培養,24小時后換液?。
培養方法?:

原代細胞培養?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養皿。
37℃、5% CO?培養,24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養。
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