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原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞
YS-01X7712大鼠牙胚細(xì)胞圖片





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 大鼠牙胚細(xì)胞圖片 | 英文名稱 | Rat Tooth Germ Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7712 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠牙胚細(xì)胞
組織來源 牙胚組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 大鼠牙胚細(xì)胞分離自牙胚組織;牙胚是牙齒開始發(fā)育階段的形態(tài),是由牙板向深層的結(jié)締組織內(nèi)伸延,在其末端細(xì)胞增生,進(jìn)一步發(fā)育成牙胚。牙胚有三部分組成:①成釉器(enamel organ),起源于口腔外胚層,形成釉質(zhì);②牙乳頭(dental papilla),起源于外胚層間充質(zhì),形成牙髓和牙本質(zhì);③牙囊(dental sac),起源于外胚層間充質(zhì),形成牙骨質(zhì)、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的發(fā)生是口腔上皮和外胚間充質(zhì)相互作用的結(jié)果。在胚胎的第5周,覆蓋在原口腔的上皮由兩層細(xì)胞組成,外層是扁平上皮細(xì)胞,內(nèi)層為矮柱狀的基底細(xì)胞。在未來的牙槽突區(qū),深層的外胚層間充組織誘導(dǎo)上皮增生,開始僅在上下頜弓的特定點(diǎn)上,上皮局部增生,很快增厚的上皮相互連接,依照頜骨的外形形成一馬蹄形上皮帶,稱為原發(fā)性上皮帶。在胚胎的第7周,這一上皮帶繼續(xù)向深層生長,并分裂為兩個(gè):向頰(唇)方向生長的上皮板稱前庭板,位于舌(腭)側(cè)的上皮板稱為牙板(dental lamina)。在胚胎的第8-10周,前庭板繼續(xù)向深層生長,與發(fā)育的牙槽嵴分開,前庭板表面上皮變性,形成口腔前庭溝。
方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙胚細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙胚細(xì)胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 大鼠牙胚細(xì)胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 梭形、多角形
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳3代左右
消化液:0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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