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原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞
YS-01X7448大鼠胸腺淋巴細(xì)胞培養(yǎng)





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PRODUCT CATEGORY相關(guān)文章
ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 大鼠胸腺淋巴細(xì)胞培養(yǎng) | 英文名稱 | Rat Thymic Lymphocyte Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X7448 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠胸腺淋巴細(xì)胞
組織來(lái)源 胸腺組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡(jiǎn)介 大鼠胸腺淋巴細(xì)胞分離自胸腺組織;胸腺是機(jī)體的重要淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具內(nèi)分泌機(jī)能的器官。位于胸腔前縱隔。胚胎后期及初生時(shí),是一生中重量相對(duì)的時(shí)期。隨年齡增長(zhǎng),胸腺繼續(xù)發(fā)育;此后胸腺逐漸退化,淋巴細(xì)胞減少,脂肪組織增多。胸腺的結(jié)構(gòu)表面有結(jié)締組織被膜,結(jié)締組織伸入胸腺實(shí)質(zhì)把胸腺分成許多不分隔的小葉。小葉周邊為皮質(zhì),深部為髓質(zhì)。皮質(zhì)不包圍髓質(zhì),相鄰小葉髓質(zhì)彼此銜接。皮質(zhì)主要由淋巴細(xì)胞和上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)狀細(xì)胞間有密集的淋巴細(xì)胞。胸腺的淋巴細(xì)胞又稱為胸腺細(xì)胞,在皮質(zhì)淺層細(xì)胞較大,為較原始的淋巴細(xì)胞。中層為中等大小的淋巴細(xì)胞,深層為小淋巴細(xì)胞。從淺層到深層為造血干細(xì)胞增殖分化為小淋巴細(xì)胞的過(guò)程。皮質(zhì)內(nèi)還有巨噬細(xì)胞,無(wú)淋巴小結(jié)。髓質(zhì)中淋巴細(xì)胞少而稀疏,上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞多而顯著。形態(tài)多樣,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu),為其分泌物,尚有散在的圓形的胸腺小體。
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胸腺淋巴細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為1×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胸腺淋巴細(xì)胞,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 大鼠胸腺淋巴細(xì)胞 培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性: 懸浮
細(xì)胞形態(tài): 圓形
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 不增殖;不傳代
消化液:0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無(wú)菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾。
通過(guò)IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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