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當前位置:首頁產品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
產品簡介

鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-24
廠商性質:經銷商
訪問量:670
產品型號:50T
詳細介紹在線留言

產品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數規格:
產品名稱:鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Abalone Herpes-like Virus(AbHV)
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
實驗過程:
一、鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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Anti-Annexin IV  膜粘連蛋白 A4抗體 用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準) 霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) 250
Anti-Annexin V  膜粘連蛋白5抗體 用于霍亂弧菌的培養(SN標準) T1N1  Agar T1N1 瓊脂        250
Anti-Annexin VI  膜粘連蛋白 VI抗體 用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準) T1N0  Broth T1N0 肉湯         250
Anti-Annexin V  重組膜粘連蛋白-5(人)抗體 用于霍亂弧菌的生長試驗(SN標準) T1N3  Broth T1N3 肉湯         250
Anti-Anthrax  炭疽桿菌抗體 用于霍亂弧菌的復合生化試驗(SN標準) Arginine Dextrose Agar 精氨酸葡萄糖斜面瓊脂     100
Anti-Anthrax  炭疽菌抗體(采用活疫苗制備) 用于弧菌分離培養(FDA標準) mCPC Medium mCPC 培養基 250
Anti-alpha Adaptin  銜接蛋白α抗體 每瓶添加于100ml mCPC培養基中 mCPC Medium Supplement mCPC培養基添加劑 1ml*5
Anti-beta Adaptin/AP2  銜接蛋白β抗體 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養 副溶血性弧菌瓊脂 250
Anti-Gamma-Adaptin  銜接蛋白γ抗體 用于副溶血性弧菌的增菌培養 副溶血性弧菌增菌液 250
Anti-Apaf-1(CT)  凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端) 用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用 Czapek Dox Agar 察氏瓊脂     250
Anti-Apaf-1(NT)  凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 用于青霉、曲霉的產毒培養 Toxin-Producing Medium 產毒培養基     250
Anti-Activated protein C  活化蛋白C抗體 用于霉菌、酵母菌計數(GB標準) Potato Dextrose Agar 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)   250
Anti-Apelin  脂肪炎癥因子Apelin抗體 用于霉菌和酵母菌的計數(GB標準) Salt Czapek Dox Agar 高鹽察氏瓊脂   250
Anti-Apelin receptor  Apelin receptor抗體 用于真菌檢測(GB標準) Sabouraud’s Agar 沙氏瓊脂培養基    250
Anti-APC/Adenomatous Polyposis Coli  腺瘤樣息肉抗體 用于真菌培養 Corn Meat Medium 玉米粉瓊脂   250
Anti-APEX1  多功能DNA修復酶抗體 用于食品中霉菌及酵母菌總數測定 Rose Bengal Medium 孟加拉紅培養基    250
Anti-ATH III  凝血酶Ⅲ抗體 用于食品中霉菌及酵母菌總數測定 Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol  Agar 酵母粉葡萄糖氯霉素瓊脂 250
Anti-APG4B/AUTL1  細胞自噬相關蛋白4B抗體 用于食品中Candida及酵母菌總數測定(Merck方法) Candida Elective Agar to Nickerson Candida Elective 瓊脂 250
Anti-APNG/MPG  N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 用于食品中真菌的培養(Merck方法) DTM Medium DTM培養基 250
Anti-APOD  載脂蛋白D抗體 用于食品中霉菌及酵母菌分離培養 DRBC Agar DRBC瓊脂 250
Anti-APOH  載脂蛋白H抗體 用于真菌,特別是酵母菌的計數和增菌培養(Merck方法) Wort Agar WORT 瓊脂 250
Anti-APOE  載脂蛋白E抗體 用于真菌,特別是酵母菌的培養(Merck方法) Wort Broth WORT 肉湯 250
Anti-APOJ  載脂蛋白J抗體 用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分離培養(ISO方法) YGC Agar YGC瓊脂 250
Anti-Apollon/BIRC6  Apollon凋亡抑制蛋白抗體 用于飲料中真菌及酵母菌檢測(Acumedia方法) m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 改良綠色酵母菌和真菌肉湯 250
Anti-APP/ABPP  淀粉樣肽前體蛋白抗體 用于真菌的分離培養(Acumedia方法) Littman Agar Littman 瓊脂 250
Anti-APP/ABPP  APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體 用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(Acumedia方法) DICHLORANGLYCEROL (DG-18) AGAR  DG-18瓊脂 250
Anti-phospho-APP/ABPP(Tyr757)  磷酸化APP(Tyr757)淀粉樣肽前體蛋白抗體 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(Acumedia方法) YM Agar YM瓊脂 250
Anti-phospho-APP/ABPP(Thr668)  磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養(NEOGEN方法) YM11 Agar YM11瓊脂 250
Anti-APPL1  APPL1抗體 用于霉菌和酵母菌分離培養和計數(Merck方法) OGY Agar OGY瓊脂 250
anti-AQP1  水通道蛋白1抗體 用于啤酒和發酵產品中酵母菌和細菌的計數 WL Nutrient Agar WL營養瓊脂 250
Anti-AQP2  水通道蛋白-2抗體 用于真菌檢測 Sabouraud’s Agar,Modified 改良沙氏瓊脂培養基    250
Anti-AQP3  水通道蛋白-3抗體 用于真菌檢測(Acumedia 方法) Sabouraud BHI Agar 沙氏BHI瓊脂 250
Anti-AQP4  水通道蛋白-4抗體 用于四環素檢定中蠟樣芽孢桿菌的培養(SN標準) Strain Medium(for B.Cereus) 菌種培養基       250
Anti-AQP5  水通道蛋白-5抗體 用于四環素殘留的微生物學檢定(SN標準) Tetracyline Examination Agar 四環素檢定瓊脂     250
Anti-AQP7  水通道蛋白-7抗體 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數、平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(SN標準) Glucose Tryptone Agar 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250
Anti-AQP9  水通道蛋白-9抗體 用于彎曲桿菌分離(SN標準) Brucella Agar 布氏瓊脂    250
Anti-AR  雄激素受體抗體 用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂制備(SN標準) Brucella Broth 布氏肉湯    250
Anti-phospho-Androgen Receptor (Ser580)  磷酸化雄激素受體抗體 用于空腸彎曲菌的分離培養(SN 、GB標準) Skirrow Agar Base,Modified 改良Skirrow氏瓊脂基礎     250
Anti-phospho-Androgen Receptor (Ser595)  磷酸化雄激素受體抗體 用于彎曲桿菌選擇性分離培養(GB標準) Camp-BAP Agar Base,Modified 改良Camp-BAP氏瓊脂基礎 250
Anti-ARHI  ARHI蛋白抗體 用于彎曲桿菌的TTC試驗(GB標準) TTC Agar Base TTC 瓊脂基礎          250
Anti-AKR1B1  醛糖還原酶抗體 用于彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗(GB標準) Glycine Medium 甘氨酸培養基         250
Anti-ARC  ARC抗體 用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(GB標準) H2S Test Medium 快速硫化氫試驗瓊脂     250
Anti-ARF6  ADP核糖基化因子6抗體 用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(GB標準) Dnase Agar Base with Methyl Green DNA酶甲基綠瓊脂基礎    100
Anti-Arfaptin 1  ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體 用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(GB標準) 馬尿酸鈉培養基 100
Anti-Arfaptin 2  ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體 用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(GB標準) 快速硫化氫(H2S)試驗瓊脂 250
Anti-phospho-arfaptin 2(Ser260)  磷酸化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體 用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(Merck方法) Bolton Selective Enrichment broth 波爾頓選擇性增菌肉湯 250
Anti-phospho-Arhgef2(Ser810)  磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體 用于彎曲桿菌分離培養(WHO方法) CCDA Base CCDA基礎 250
Anti-Aromatase   芳香化酶抗體 每支添加于200mlCCDA基礎中 CCDA Supplement CCDA添加劑 2ml*10支
Anti-Aromatase   芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體 用于彎曲桿菌分離培養(FDA方法) Campy-Cefex Agar Base Campy-Cefex 瓊脂基礎 250
Anti-COX-2  細胞色素c氧化酶抗體 每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎中 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex 添加劑 2ml*10
Anti-COX7A2  細胞色素c氧化酶COX7A2抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數(GB.SN標準) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(MYP)  250
Anti-ARIP2a  激活素受體2A抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的MPN值測定 (SN標準) Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎   250
Anti-Beta-arrestin 1  β-抑制蛋白1抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(SN標準) V-P Medium,Modified 改良V-P培養基  250
Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412)  磷酸化β抑制蛋白1抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測試驗(SN標準) Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎   250
Anti-Beta-arrestin 2  β-抑制蛋白2抗體 用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗  (GB標準) Casein Agar 酪蛋白瓊脂    250
Anti-ARIP2B  激活素受體2B抗體 用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(SN標準) Phenol Red Dextrose Broth 酚紅葡萄糖肉湯 250
Anti-Artemin  Artemin抗體 用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗 木糖-明膠培養基 250
Anti-ARAlpha1/ADRA1B  alpha 1腎上腺素能受體抗體 用于臘樣芽胞桿菌選擇性分離培養 Bacilus Cereus Selective Agar Base 臘樣芽胞桿菌選擇瓊脂基礎 250
Anti-MASH1  神經母細胞特異性轉移因子抗體 用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計數(APHA方法) Dextrose Casein-peptone Agar 葡萄糖酪胨瓊脂 250
鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒Anti-ASIC1/BNaC2  酸敏感離子通道1抗體 加入250ml TSC瓊脂基礎中 D-環絲氨酸     0.1g/支*2
Anti-ASPP1  p53凋亡刺激蛋白1抗體 用于產氣莢膜梭菌的產芽孢培養 Sporulation Broth 產芽孢肉湯    250
Anti-ASPP2/p53BP2  P53凋亡刺激蛋白2抗體 用1ml無菌水溶解后添加于100ml HB0256中 Polymyxin B 多粘菌素B   1.2mg/支*5
Anti-AGT  血管緊張素原抗體 用于產氣莢膜梭菌的培養(SN標準) Poly Peptone Yeast Extract Medium 多價蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養基     250

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