【友情提示】：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！

產品名稱：輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒規格

規格 : 50管/24樣、100管/48樣

測試方法:微量法、可見分光光度法

貨號：YS-01S6334

測定意義

輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態的主要標志之一，而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。

測定原理

分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測吸光值，從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH，從而檢測NADP+含量。

所需的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或*將酸性樣品的PH值調至8.0。

5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點:

(1)應用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

Anti-p53BP1/53BP1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠p53結合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies規格： 0.3ml

C-藻藍素/藻藍蛋白抗體 Anti-C-PC 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG/Bio 生物素標記的兔抗豬IgG 0.1ml

FARSLA/CML33 英文名稱： 慢性粒細胞白血病33抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PI3 Kinase p110 delta 磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體 規格 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies規格： 0.3ml

IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干擾素-γ多肽抗原(大、小鼠)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

Anti-CDC42 細胞分化周期CDC42蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh OMPC 大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體 規格 0.1ml

CST1 Kit Human 人 Cystatin SN / CST1 ELISA配對抗體 ELISA

TTC8 英文名稱： 巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白8抗體 0.1ml

C6orf222 英文名稱： 6號染色體開放閱讀框222抗體 0.2ml

Anti-CDC42 細胞分化周期CDC42蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.2ml

rSec6 英文名稱： 胞吐分泌蛋白Sec6抗體 0.2ml

EGFRvIII 英文名稱： 表皮生長因子受體III型突變體抗體 0.1ml

血小板源性生長因子-A抗體 Anti-PDGF-A 0.1ml

Anti-52KDa Ro/SSA /FITC 熒光素標記核糖核蛋白抗原52kD-Ro/SSA抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 規格 0.1ml

FoxP3 叉頭蛋白3-T細胞轉錄因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規格： 0.5mg
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒規格胡椒堿骨碎補凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

胡椒堿(標準品)青黛石蠟切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

紐莫康定B0(肺囊康定) 豬牙皂 載玻片GSK-3ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

福莫特羅 紫蘇梗 凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

溴甲后馬托品雞血藤 石蠟切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

乙酸阿比特龍酯鬧洋花 GSK-3ALPHA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

溴莫尼定 葛根(甘葛藤) GSK-3ALPHA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

磺草靈爵床 GSK-3ALPHA蛋白表達西方雜交分析試劑盒
操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。