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當前位置:首頁產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒

摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品簡介

摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-29
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:483
產(chǎn)品型號:50T
詳細介紹在線留言

實驗過程:
一、摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Morganella morganii
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Cryptotanshinone腫瘤壞死因子超家族15檢測試劑盒5mg

 CW-2(人結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2

抗核糖體P蛋白抗體(ARPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 SYT6 / Synaptotagmin VI 蛋白 (His 標簽)*1000(g)

MMP3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶3CAS號:1135246 總?cè)~綠素檢測試盒100THuman/人Elisa試盒3034488

Dihydrotanshinone I腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ檢測試劑盒20mg

氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Oxypaeoniflorin

蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 RBP7 蛋白 (His 標簽)*5mL/支×10(g)

人纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)UBE2J2  泛素蛋白連接酶J2抗體規(guī)格:96T/48TSAdenosylLHomocysteine規(guī)格:200mgapelin 13檢測試盒20mg人成巨核細胞白血病細胞,MEG01細胞1x10^6cells

紫堇醇靈ROX參比染料5mg

4-[2-(5--2-基甲酰)  英文名稱:4[2 (5 chloro 2 methoxy benzoyl amide)   保存:-20℃   規(guī)格:50mg 成視網(wǎng)膜細胞瘤基因抗體

No.4 Agar Base250水痘帶狀皰疹病IgM抗體檢測試盒5mgI型原膠原N端前肽檢測試盒Interleukin1

異鼠李素3O新橙皮糖苷ROX參比染料5mg

巴豆苷 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg ELISA Kit for Human Bone sialoprotein 2小鼠T-細胞激活連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒,英文名:LAT ELISA Kit

SalmonellaShigella Agar250RNA結(jié)合基元蛋白8檢測試盒5mg白細胞介素1檢測試盒Insulin

2× SYBR Green qPCR 試劑盒5mg

牡荊素葡萄糖苷 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 人夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒,英文名:a-Glu ELISA Kit

EosinMethylene Blue Agar250CXC趨化子配體1檢測試盒5mg胰島素檢測試盒CReactiveProtein
摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒絡(luò)石苷;Tracheloside CAS號: 33464710 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

莨菪堿;LHyoscyamine CAS號: 101315 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

鐮葉芹二;Falcarindiol CAS號: 225110258 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

羅漢松樹脂 ;Matairesinol CAS號: 580723 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

雷公藤定堿;Wtlfordine CAS號: 37239513 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢

蘿卜素;Sulforaphane CAS號: 4478937 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

雷公藤內(nèi);Triptolide,14 CAS號: 38647119 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

路路通;Liquidambaric a CAS號: 4481623 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

利卡靈B;()Licarin B CAS號: 51020872 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

氯矢車菊素;Cyanidin Chlo CAS號: 528585 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢

酪;4Hydroxyphenethy CAS號: 501940 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

胡黃連苷III;Picroside II CAS號: 64461956 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢

萊苞迪甙A;Rebaudioside A CAS號: 58543161 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 ;Borneol CAS號: 6627721 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

軟骨素;Chondroitin 4 CAS號: 24967939 規(guī)格: 30mg 訂購|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。

 

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