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    產(chǎn)品中心

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    當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒50T人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

    人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
    產(chǎn)品簡(jiǎn)介

    人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

    更新時(shí)間:2020-09-28
    廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
    訪(fǎng)問(wèn)量:425
    產(chǎn)品型號(hào):50T
    詳細(xì)介紹在線(xiàn)留言

    實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
    一、人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒試劑準(zhǔn)備
    1. DNA模板
    2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
          10×PCR buffer             5μl
          dNTP mixl                 4μl
          引物1(10pM)               2μl
          引物2(10PM)              2μl
          Taq酶(2U/μl)            1μl
          DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
         加ddH2O至               50 μl
         視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
    3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
    4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
    參數(shù)規(guī)格:
    產(chǎn)品名稱(chēng):人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
    英文名稱(chēng):Human Papillomavirus 16(HPV-16)
    產(chǎn)品規(guī)格:50T
    產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
    產(chǎn)品保存:-20℃保存
    產(chǎn)品有效期:一年
    產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
    運(yùn)輸及保存
    低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
    自備試劑
    DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    ?
    產(chǎn)品及特點(diǎn):
    1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
    2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛勘J匦蛄性O(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
    3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
    4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
    5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
    以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
    Radix notoginseng三七染料法PCR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix notoginseng三七探針?lè)≒CR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix ophiopogonis麥冬LAMP鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix ophiopogonis麥冬PCR鑒定試劑盒非模式菌株研究小型絲狀真菌。

    Radix ophiopogonis麥冬染料法PCR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix ophiopogonis麥冬探針?lè)≒CR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix paeoniae alba白芍LAMP鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌

    Radix paeoniae alba白芍PCR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌

    Radix paeoniae alba白芍染料法PCR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。Production of citric acid

    Radix paeoniae alba白芍探針?lè)≒CR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌

    Radix paeoniae rubra赤芍LAMP鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix paeoniae rubra赤芍PCR鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。

    Radix paeoniae rubra赤芍染料法PCR鑒定試劑盒模式菌株分類(lèi)子囊菌類(lèi)酵母菌。模式菌株

    Radix paeoniae rubra赤芍探針?lè)≒CR鑒定試劑盒模式菌株分類(lèi)子囊菌類(lèi)酵母菌。模式菌株

    Radix panacis quinquefolii西洋參LAMP鑒定試劑盒非模式菌株研究子囊菌類(lèi)酵母菌。
    人乳頭瘤病毒16探針?lè)晒舛縋CR試劑盒NKCC1(胞外)抗體(50ul) Anti-NKCC1 (extracellular)

    NKCC1(胞外)抗體(0.2ml) Anti-NKCC1 (extracellular)

    NK6轉(zhuǎn)錄樣蛋白B NKX62 Polyclonal Antibody

    NK2轉(zhuǎn)錄樣蛋白C NKX23 Polyclonal Antibody

    NK2轉(zhuǎn)錄樣蛋白B NKX22 Polyclonal Antibody

    Nitrotyrosine抗體(NOY-7A5) Nitrotyrosine Antibody (NOY-7A5) (0)

    Nitrotyrosine抗體(HM11) Nitrotyrosine Antibody (HM11) (0)

    Nitrotyrosine抗體(7A5) Nitrotyrosine Antibody (7A5) (0)

    Nitrotyrosine抗體 Nitrotyrosine Antibody (0)
    使用方法:
    一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
    1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
    2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
    3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
    二、樣品DNA的制備
    8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
    9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
    三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
    10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
    11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。

     

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