【產品名稱】蜜蜂微孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Nosema spp.
【產品編號】YSP7021
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因，與同類產品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高。

PCR實驗方法步驟：
蜜蜂微孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
98%250mg500g苦參醇Alphafetoprotein

土槿皮-O-β-D-葡萄糖苷 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒，英文名：DNMT1 ELISA Kit

骨鈣素(OC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 PROC1 / Protein C / PROC 蛋白 (His 標簽)*250(g)

ANG II (Human angiotension II ) ELISA Kit  人血管緊張素ⅡCAS號：107007954 糞卟啉原Ⅲ檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒30751054

98%500g25g蒿草酚A19333109Methionine

檸檬無水 質量規格：>99%,AR Citric acid 糖化酵母 Saccharomyces diastaticus人軟骨細胞*培養基

Icariin阿莫地鹽鹽標準品規格：規格：人Apelin 13(APLN13)CLIA試劑盒 0.2ml

Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit  人帕金森氏病2ParkinCAS號：707 原卟啉Ⅸ檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒30766224

D蟲熒光素鈉鹽  5mg

dATP,三脫氧腺苷鈉鹽 質量規格：>98%,BR 2'-Deoxyadenosine 5'-triphosphate disodium salt 微黃八疊球菌 Sarcina subflava微紫青霉 Penicillium janthinellum

AACT(Alpha1Antichymotrypsin)  α1抗胰糜蛋白酶進口、原裝Wnt10b蛋白檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒4920347

D蟲熒光素鈉鹽  5mg

7-乙基-10羥基喜樹堿 訂購|咨詢 規格： HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Heparan sulfate小鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA試劑盒，英文名：CASP7 ELISA Kit

AACT protein(Alpha chymotrypsin protein)  胰糜蛋白酶現貨供應布魯頓酪氨激酶檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒492080

D蟲熒光素鈉鹽  5mg

二十五(分析標準品,>99%(GC)) 質量規格：分析標準品,>99%(GC) Pentacosane

ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(139)  促上腺皮質激素(139)（抗原）*內源性大麻素檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒492273
蜜蜂微孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒去吳茱萸堿 CAS號： 67909493 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

青酶 CAS號： 9001745 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

千金子甾 CAS號： 28649594 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

原阿堿 CAS號： 128397411 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

7羥5,8二氧黃 CAS號： 54377241 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

10羥攀援山橙堿 CAS號： 119188475 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

去氧穿心蓮內 CAS號： 79233151 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

羥芫花素 CAS號： 20243598 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

7羥馬兜鈴A CAS號： 79185754 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

5羥馬鞭草苷 CAS號： 50816245 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

去氧醉椒素 CAS號： 15345898 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

去駱駝蓬堿 CAS號： 442513 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

青琥 CAS號： 88495630 規格： HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢

曲克蘆 CAS號： 7085554 規格： HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢

高烏素 CAS號： 97792455 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。