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結(jié)腸癌細胞;HCT 116




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ARTICLES細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:結(jié)腸癌細胞;HCT 116
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9605
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
OVA/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
胸腺肽 α-1抗體 Thymosin α-1 0.1ml
S100 alpha 2 英文名稱: S100A2抗體 0.2ml
EAAT3 英文名稱: 膠質(zhì)細胞谷酸運載蛋白3抗體(神經(jīng)/上皮細胞谷酸運載蛋白) 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-KSR1 (Ser392) 磷酸化Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PHF8 組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8抗體 規(guī)格 0.2ml
HSP70 熱休克蛋白70 濃縮液 0.1ml 進口分裝
UBXN2B 英文名稱: UBXN2B蛋白抗體 0.1ml
CSFV 英文名稱: 豬瘟病毒抗體 0.2ml
Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SMC2 英文名稱: 染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 0.2ml
phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187) 英文名稱: 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗體 0.1ml
線粒體促凋亡蛋白抗體 Smac/DIABLO 0.1ml
Tetraspan5/FITC 熒光素標(biāo)記四分子交聯(lián)體5抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAX protein(Tyr123) 磷酸化Myc基因相關(guān)X因子抗體 規(guī)格 0.1ml
MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC 致癌基因(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
結(jié)腸癌細胞;HCT 116L-谷氨酸(sigma)苦菜子重組腺病PCR鑒定試劑盒
DL-谷氨酸桃金娘根腺病凍存培養(yǎng)基
肌氨酸珠子草腺病凍存培養(yǎng)基(動物實驗)
甘氨酸-DL-亮氨酸烏賊墨Bosc23 包裝克隆選擇培養(yǎng)基
L-亮氨酰甘氨酸黃芫花PA317包裝克隆選擇培養(yǎng)基
蒜氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)荷葉重組逆轉(zhuǎn)錄病穩(wěn)態(tài)表達克隆凍存試劑盒
L-脯氨酸蜂膠重組腺病構(gòu)建試劑盒
DL-纈氨酸冬凌草重組腺病包裝試劑盒
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