T4 RNA連接酶實驗方法
〖英文名稱〗：T4 RNA Ligase

〖分子量〗：43.6kDa，單體

〖級別〗：BR

〖來源：含有T4噬菌體克隆基因63的大腸桿菌

〖濃度〗：10u/ul

〖活性定義〗：是指在37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol 5'-[32P]-(A)12-18轉(zhuǎn)化為磷酸酶抗性形式所需的酶量

〖酶活性分析混合物〗：50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端）

〖保存液組分〗：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA，0.5mM ELUGENT變性劑和50%(v/v)甘油

〖10×反應(yīng)緩沖液〗：500mM HEPES-NaOH(PH8.0，25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT

〖抑制劑〗：金屬螯合劑、SH基團修飾試劑

〖失活〗：70℃加熱10分鐘

〖質(zhì)量控制〗：測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染

〖備注〗：反應(yīng)體系中ATP的濃度取決于連接反應(yīng)的類型，推薦的BSA反應(yīng)濃度是0.1mg/ml

〖性狀(以下信息僅供參考)〗：重組酶，催化ATP依賴的分子內(nèi)和分子間磷酸二酯鍵連接（5'-磷酸基團和3'-羥基末端），底物分子為多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA，分子之間的zui小的連接底物是核苷3'，5'-二磷酸，而分子內(nèi)連接的zui小底物是8個堿基的寡核苷酸。配套提供反應(yīng)緩沖液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯鍵的形成，使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羥基末端連接。作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸。隨酶提供10X 反應(yīng)緩沖液

〖用途〗：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)連接RNA和RNA ；RNA3'-末端標記胞嘧啶3'，5'-雙[a-32P]磷酸； tRNA的特異性修飾；合成寡核苷酸的環(huán)化；寡聚脫氧核糖核苷酸與單鏈cDNA連接，用于5'RACE（快速擴增cDNA末端）分析

〖保存〗： -20°C

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XLT4瓊脂250g/瓶用于沙門氏菌等腸道致病菌的選擇性分離incubationmediaXLT4瓊脂250g/瓶用于沙門氏菌等腸道致病菌的選擇性分離

CIN-1Agar
大鼠肝癌細胞;RH-35

TPO Others Human 人 Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0001293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 腎上腺皮質(zhì)瘤細胞,SW 13細胞 TT(人甲狀腺癌細胞)

小鼠小膠質(zhì)細胞;BV2

MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)
IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0391NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)5×106cells/瓶×2

人羊膜上皮細胞總RNAHAmEpiC tRNA

SKBr-2HL細胞，人癌細胞 雞胚原代肝細胞,CEL細胞 SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

MuM-2C(人眼脈絡(luò)色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC pre-screened Pellet 人臍靜脈內(nèi)皮細胞(預(yù)選型) > 1 mio.cells 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基KM-acf
CL-0391NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)5×106cells/瓶×2

IL12B Others Mouse 小鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

人羊膜上皮細胞總RNAHAmEpiC tRNA

SKBr-2HL細胞，人癌細胞 雞胚原代肝細胞,CEL細胞 SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

MuM-2C(人眼脈絡(luò)色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC pre-screened Pellet 人臍靜脈內(nèi)皮細胞(預(yù)選型) > 1 mio.cells 角質(zhì)細胞培養(yǎng)基KM-acf

T4 RNA連接酶實驗方法Hep-2, 人喉癌細胞系 Human

人胚腎細胞;293 [HEK-293]

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

正常大鼠腎細胞;NRK-52E 胸膜細胞瘤，SMC-1細胞 RIN-m細胞，褐鼠胰島素瘤上皮細胞

小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r

RPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)