產品名稱：小鼠胚胎成骨細胞前體細胞;MC3T3-E1

規格：1×10?cells/T25培養瓶
貨號：YS-02X9815

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研

細胞培養步驟

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養基；優質胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態，細胞最好在對數生長期，細胞密度適合，剛剛發生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節約處就節約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關于“慢凍"，傳統的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內裝異丙醇，在-80度并內可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途，選擇適宜的培養基，培養基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養基各種成分放入容器內，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內（試管內每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規則細胞，貼壁培養。
Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標記小鼠抗慶大單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.5ml(35nm-40nm)

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

銜接蛋白β抗體  beta Adaptin/AP2 0.1ml

ZADH1 英文名稱： 鋅結合乙醇脫氫酶結構域蛋白1抗體 0.2ml

DYRK1A 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白激酶MNB抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser87) 磷酸化雌受體β抗體 規格 0.1ml

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠)Multi-class antibodies規格： 0.5mg

ZO-1 peptide 胞質緊密粘連蛋白1抗原Multi-class antibodies規格： 0.5mg

 Phospho-Beta-Catenin (Ser33/37) 磷酸化β 連環素蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHGB4 原鈣粘蛋白γB4抗體 規格 0.2ml

IL1R1 Kit Human 人 IL1R1 / CD121a ELISA配對抗體 ELISA

THRB1 英文名稱： 甲狀腺受體β抗體(THβ1，THβ2) 0.2ml

Phospho-cdc2 (Thr14) 英文名稱： 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 0.1ml

 Phospho-Beta-Catenin (Ser33/37) 磷酸化β 連環素蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml

Dog IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml

RMD2 英文名稱： 微管動力調節蛋白2抗體 0.2ml

丙型肝炎病毒-C區抗體  HCV-Core 0.1ml

 PKB/AKT-1 /FITC 熒光素標記蛋白激酶B抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Ser427) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規格 0.1ml

Bovine IgM (親和純化) IgMMulti-class antibodies規格： 1mg
小鼠胚胎成骨細胞前體細胞;MC3T3-E1PIPES；1,4-哌二乙磺酸育亨賓DNA末端平滑補缺同位素（[35S]dATP）聚合酶標記試劑盒

4,4-二硫二吡啶鳶尾黃素三聯重復子延展度同位素（[γ32P]ATP）酶標記法檢測試劑盒

2,2'-二硫二吡啶原堿同位素[α32P]dCTP聚合酶標記微衛星擴增試劑盒

4-甲基原兒茶同位素[γ32P]ATP酶標記微衛星擴增試劑盒

MOPSO, Na；3-嗎啉-2-羥基磺酸鈉原兒茶酸同位素標記放射活性TCA檢測試劑盒

MOPSO；3-嗎啉-2-羥基磺酸原花青素B1隨機引物DNA探針同位素標記產物*雙鏈制備試劑盒

3-(N-啉)磺酸鈉鹽原花青素B2同位素標記放射活性濾膜法檢測試劑盒

3-(N-啉)磺酸半鈉鹽原花青素B3同位素標記放射活性離心柱檢測試劑盒