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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章錦葵色素-O-葡萄糖苷含量測試盒?操作步驟

錦葵色素-O-葡萄糖苷含量測試盒?操作步驟

更新時間:2022-01-18點擊次數(shù):368

錦葵色素-O-葡萄糖苷含量測試盒操作步驟(僅供參考):  

1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。

2.準(zhǔn)備樣品:  

a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。  

b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。  

c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。

d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  

e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。

f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  

3、CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。

4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計,亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時內(nèi)檢測完畢。

ADAR1 (C-terminus)雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)

AF10髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體

ADCY1腺苷酸環(huán)化酶1抗體

APC腺瘤樣息肉抗體

AGPAT1溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體

ANKS3錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體

phospho-ALK (Tyr1586)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

AMSH信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體

ASB3錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體

Aurora C有絲分裂激酶B抗體

Phospho-Ack1 (Tyr284)磷酸化Ack1抗體

Phospho-Ack1 (Tyr326)磷酸化Ack1抗體

Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412)磷酸化β抑制蛋白1抗體

Phospho-Aurora A (Thr288)磷酸化有絲分裂激酶A抗體

phospho-APS(Ser598)磷酸化APS抗體

Aurora A有絲分裂激酶A抗體

AIM2干擾素誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體

Aquaporine 2水通道蛋白-2抗體

ABI2腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體

ARL11ADP核糖基化因子樣11抗體


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